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La sustancia problema se administra de wann wieder ajuste nach próstata opini continua en dosis graduadas a varios grupos de machos y hembras sexualmente maduros. Esta generación parental P recibe la sustancia durante un período determinado antes del apareamiento seleccionado en función de la información disponible sobre la sustancia problema, pero de un mínimo de dos semanas y durante dos semanas del período de apareamiento.

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Los machos P se siguen tratando por lo menos hasta el destete de la generación F 1. El tiempo mínimo de tratamiento para ellos es de 10 semanas. A los descendientes F 1 se les sigue administrando la sustancia problema desde el destete hasta la edad adulta. Se someten wann wieder ajuste nach próstata opini los animales a observación clínica y examen patológico para detectar signos de toxicidad, insistiendo especialmente en los efectos sobre la integridad y el comportamiento del aparato reproductor de las hembras y de los machos, y sobre la salud, el crecimiento, el desarrollo y la actividad de los descendientes.

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Esquema del estudio ampliado de toxicidad para la reproducción en una generación. Selección de la especie y de la cepa de los animales.

Por favor, disculpen cualquier imprecisión.

La elección de la especie empleada en el ensayo de toxicidad para la reproducción tiene que considerarse con detenimiento a la vista de toda la información disponible. Sin embargo, debido a la amplitud de los datos previos y a la comparabilidad con los ensayos de toxicidad general, la rata es normalmente la especie preferida, y los criterios y recomendaciones wann wieder ajuste nach próstata opini en el presente método de ensayo se refieren a esta especie.

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Edad, peso corporal y criterios de inclusión. Deben utilizarse animales parentales sanos, que no se hayan sometido a experimentos previos. Deben estudiarse tanto machos como hembras, y estas deben ser nulíparas y no gestantes. Los animales P deben ser sexualmente maduros, de peso similar dentro de cada sexo al inicio de la administración, de edad similar de unos 90 días en el momento del apareamiento, y representativos de la especie y cepa estudiada.

Los animales deben aclimatarse wann wieder ajuste nach próstata opini al menos 5 días después de su llegada.

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La iluminación, artificial, debe fijarse a una secuencia de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad. Pueden utilizarse dietas wann wieder ajuste nach próstata opini de laboratorio Dietas faciles con un aporte ilimitado de agua de bebida. Se recomienda utilizar dietas normalizadas, de composición abierta, en las que se haya reducido el contenido de sustancias estrogénicas 2 La elección de la dieta puede verse influida por la necesidad de garantizar una mezcla conveniente de la sustancia problema si se administra por este método.

Deben determinarse el contenido, la homogeneidad y la estabilidad de la sustancia problema en las dietas. La comida y el agua de bebida deben analizarse periódicamente para detectar la posible presencia de contaminantes. Los animales se deben alojar en jaulas en pequeños grupos del mismo sexo y grupo de tratamiento.

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Pueden ser alojados individualmente, a fin de evitar posibles daños por ejemplo, los machos después del período de apareamiento. Las camadas se alojan con sus madres hasta el destete.

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Los animales F 1 deben alojarse en pequeños grupos del mismo sexo y grupo de tratamiento desde el destete hasta el sacrificio. Cuando esté científicamente justificado, los animales pueden alojarse individualmente. El nivel de fitoestrógenos contenido en el material de cama seleccionado debe ser mínimo. El objetivo es conseguir suficientes gestaciones para garantizar una evaluación significativa del potencial de la sustancia problema para afectar a la fertilidad, gestación y comportamiento materno de la generación P, y wann wieder ajuste nach próstata opini crecimiento y desarrollo de los descendientes F 1desde la concepción hasta la madurez.

Si los datos históricos del laboratorio indican la posibilidad de que una proporción significativa de las hembras no presente ciclos estrales regulares de 4 o 5 díasse aconseja efectuar una evaluación de los ciclos estrales antes del comienzo del tratamiento.

También se puede aumentar el tamaño de los grupos para asegurarse de que al menos 20 hembras de cada grupo tienen ciclos estrales regulares de 4 o 5 días al inicio del tratamiento.

Todos los descendientes F 1 se identifican inequívocamente cuando se examinan los neonatos por primera vez el día postnatal DPN 0 o wann wieder ajuste nach próstata opini. A lo largo de todo wann wieder ajuste nach próstata opini estudio debe mantenerse un registro donde se indique la camada de origen de todos los animales de la generación F 1y de la F 2 en su caso. Información disponible sobre la sustancia problema. El examen de la información existente es importante para tomar decisiones sobre la vía de administración, la elección del vehículo, la selección de la especie animal, la selección de las dosis y las posibles modificaciones del calendario de administración.

Consideración de los datos toxicocinéticos. También debe Adelgazar 50 kilos atención a los datos toxicocinéticos adicionales de que se disponga, tales como perfiles de metabolitos, evolución de la concentración a lo largo del tiempo, etc.

Sangre materna y sangre fetal al final de la gestación por ejemplo, en el día de gestación Muestras de sangre de los animales destetados al poco tiempo del destete por ejemplo, DPN Debe aplicarse cierta flexibilidad para la determinación de los analitos específicos por ejemplo, sustancia madre o sus metabolitos y para el programa de muestreo.

Sin embargo, no es necesario generar una curva completa de concentración-tiempo para cada día de muestreo. Vía de administración. Elección del vehículo. En caso necesario, la sustancia problema se disuelve o suspende en un vehículo adecuado. Se recomienda que, wann wieder ajuste nach próstata opini que sea posible, se considere en primer lugar el uso de una solución o suspensión acuosa, y solo después el de una solución o emulsión oleosa por ejemplo, wann wieder ajuste nach próstata opini aceite de maíz.

Si se emplean vehículos distintos del agua, deben conocerse sus características tóxicas.

Debe evitarse la utilización de vehículos con potencial de toxicidad intrínseca por ejemplo, acetona, DMSO. Debe prestarse atención a las siguientes características si se utiliza un vehículo u otro aditivo para facilitar la administración de la sustancia problema: los efectos sobre la absorción, distribución, metabolismo o retención de dicha sustancia; los efectos sobre las propiedades químicas de la sustancia problema que puedan modificar sus características de toxicidad; y los efectos sobre el consumo de alimentos y agua o sobre el estado nutricional de los animales.

Selección de las dosis. Normalmente, el estudio debe incluir al menos tres dosis y un control en paralelo. A la hora de seleccionar los niveles adecuados de dosis, el investigador ha de considerar toda la información disponible, incluida la información sobre dosis procedente de estudios anteriores, los datos toxicocinéticos de animales gestantes o no gestantes, la medida de la transferencia por la wann wieder ajuste nach próstata opini y las estimaciones de la exposición humana.

Si se dispone perdiendo peso datos toxicocinéticos que indiquen saturación de los procesos toxicocinéticos en función de la dosis, debe tenerse cuidado para evitar niveles altos wann wieder ajuste nach próstata opini dosis que provoquen claramente la saturación, siempre, por supuesto, que la exposición humana prevista esté bastante por debajo del punto de saturación.

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En ausencia de datos toxicocinéticos pertinentes, las dosis deben basarse en los efectos tóxicos, a menos que las características fisicoquímicas de la sustancia problema impongan alguna limitación. A menudo es preferible añadir un cuarto grupo de ensayo antes que utilizar un intervalo muy grande entre dosis por ejemplo, con un factor superior a Este grupo de control no debe recibir tratamiento, wann wieder ajuste nach próstata opini recibir un placebo, o ser un grupo de control del vehículo si este se utiliza para administrar la sustancia.

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En este caso, el grupo de control ha de recibir el mayor wann wieder ajuste nach próstata opini de vehículo que se haya utilizado. Estas consideraciones sobre el ensayo límite son aplicables solo cuando la exposición humana no indique la necesidad de utilizar una dosis superior. Exposición de la descendencia. La exposición alimentaria es el método preferido de administración. Si se realizan ensayos por vía oral forzada, debe tenerse en cuenta que normalmente las crías reciben la sustancia problema solo indirectamente a través de la leche materna, hasta que se inicie la administración directa tras el destete.

Debe estudiarse la conveniencia de modificar el diseño del estudio cuando la excreción wann wieder ajuste nach próstata opini la sustancia problema en la leche sea escasa y cuando no haya pruebas de una exposición continua de los descendientes. Antes de realizar estudios de administración directa de la sustancia a las crías lactantes, deben considerarse cuidadosamente sus ventajas e inconvenientes 5.

Calendario y administración de las dosis. Por lo tanto, la duración del tratamiento antes del apareamiento en el estudio ampliado de toxicidad para la reproducción en una generación tiene como objetivo la detección de efectos sobre los cambios funcionales que pueden interferir con la conducta de apareamiento y Adelgazar 15 kilos fertilización. El tratamiento antes del apareamiento debe ser lo wann wieder ajuste nach próstata opini largo para lograr unas condiciones estables de exposición en los machos y hembras P.

En la mayoría de los casos se considera adecuado un período de 2 semanas de tratamiento antes del apareamiento para ambos sexos. Las situaciones de exposición de los machos antes del apareamiento pueden modificarse si en estudios anteriores se han identificado claramente toxicidad testicular alteración de la espermatogénesis o efectos sobre la integridad y la función del esperma.

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En casos especiales puede ser aceptable que el tratamiento de las hembras P wann wieder ajuste nach próstata opini comience hasta haberse obtenido un frotis con presencia de esperma [véase el documento de orientación de la OCDE 40 ]. Una vez establecido el período de tratamiento antes del apareamiento, se administra a los animales la sustancia problema a un ritmo de 7 días por semana, de forma continua hasta la autopsia.

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Todos los animales deben recibir la sustancia de la misma manera. La administración de la sustancia debe continuar durante el período de apareamiento de 2 wann wieder ajuste nach próstata opini y, en el caso de las hembras P, a lo largo de la gestación y lactancia hasta el día del sacrificio, después del destete. Los machos deben tratarse de la misma manera, hasta su sacrificio en el momento en que se desteten los animales de la generación F 1.

Para la autopsia, debe darse prioridad a las hembras cuya autopsia ha de realizarse en el mismo día de lactancia, o en uno similar.

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A menos que ya se haya iniciado durante la lactancia, la administración directa a los machos y hembras seleccionados de la generación F 1 debe comenzar en el destete y proseguir hasta la autopsia prevista, dependiendo de la cohorte asignada. En el caso de sustancias administradas con los alimentos o el agua de bebida, es importante cerciorarse de que wann wieder ajuste nach próstata opini cantidades de sustancia problema administradas no interfieren con la nutrición normal ni con el wann wieder ajuste nach próstata opini hídrico.

Cuando la sustancia problema se administre con el alimento, se puede wann wieder ajuste nach próstata opini una concentración alimentaria constante ppm o bien una dosis constante por unidad de peso corporal de los animales; debe especificarse la opción elegida.

Excepto en el caso de sustancias irritantes o corrosivas que provoquen normalmente efectos exacerbados a concentraciones superiores, la variabilidad del volumen de ensayo debe reducirse al mínimo ajustando la concentración para que el volumen sea constante en todas las dosis.

El tratamiento debe administrarse todos los días a una hora similar. El día del parto, las hembras no deben Adelgazar 72 kilos la sustancia por vía oral forzada, ni por cualquier otra vía de tratamiento que exija la manipulación del animal; es preferible no administrar la sustancia problema ese día antes que perturbar el proceso del parto. Cada hembra P debe ponerse con un solo macho sin parentesco con ella, seleccionado al azar, del mismo grupo de tratamiento emparejamiento 1: 1 hasta que se observen signos de cópula o hayan pasado 2 semanas.

El día 0 de la gestación se define como el día en que se confirman los signos de apareamiento se observa la presencia de un tapón vaginal o de esperma.

Los animales deben separarse tan pronto como sea posible, una vez observados los signos del apareamiento. Las parejas deben quedar claramente identificadas en los resultados. El día 4 tras el nacimiento, puede adaptarse el tamaño de cada camada mediante la eliminación por selección aleatoria wann wieder ajuste nach próstata opini las crías sobrantes para obtener, en la medida de lo posible, cinco machos y cinco hembras por camada.

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Selección de las crías para los estudios tras el destete véase la figura 1. En el momento del destete alrededor del DPN 21 se seleccionan para su examen posterior crías de todas las camadas disponibles, hasta 20 por grupo de tratamiento y de control, y se conservan hasta su madurez sexual salvo que se tengan que someter a ensayo antes.

El DPN 21, las crías Wann wieder ajuste nach próstata opini 1 seleccionadas se asignan aleatoriamente a una de las tres cohortes siguientes:. Cohorte 2A : Un total de 20 crías por grupo 10 wann wieder ajuste nach próstata opini y 10 hembras por grupo; un macho o una hembra por camada asignadas para el ensayo neuroconductual seguido de la evaluación de la neurohistopatología como adultos. Cohorte 2B : Un total de 20 crías por grupo 10 machos y 10 hembras por grupo; un macho o una hembra por camada asignadas para la evaluación de la neurohistopatología en el momento del destete DPN 21 o Cohorte wann wieder ajuste nach próstata opini : Un total de 20 crías por grupo 10 machos y 10 hembras por grupo; un animal por camada, en Adelgazar 15 kilos medida de lo posible.

Pueden asignarse crías adicionales a cualquiera de las cohortes en caso de preocupación específica, por ejemplo si se sospecha que una sustancia es neurotóxica, inmunotóxica o tóxica para la reproducción.

Segundo apareamiento de los animales P.

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La necesidad de comprobar o aclarar un efecto en las hembras expuestas se puede satisfacer mejor ampliando el estudio para incluir un apareamiento de la generación F 1.

Sin embargo, un segundo apareamiento de los machos P con hembras sin tratar es siempre una opción para aclarar resultados dudosos o para caracterizar mejor los efectos sobre la fertilidad observados en el primer apareamiento.

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Con los animales P y con los F 1 seleccionados, se hace una observación clínica general una vez al día. Se registran los cambios pertinentes en el comportamiento, los signos de parto difícil o prolongado y todos los signos de toxicidad.

Dos veces al día, y una vez al día durante los fines de semana, todos los animales se observan para detectar los casos de toxicidad grave, morbilidad y wann wieder ajuste nach próstata opini.

Las observaciones deben llevarse a cabo cuidadosamente y registrarse utilizando sistemas de puntuación que hayan sido definidos por el laboratorio de ensayo. Debe procurarse que las variaciones en las condiciones de ensayo sean mínimas.

Peso corporal y consumo de alimento y agua. Los animales P se pesan el día de la primera administración y a continuación al menos una vez por semana.

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Todos los animales F 1 se pesan individualmente el día del destete DPN 21 y a continuación al menos una vez por semana. El peso corporal se registra también el día en que el animal alcanza la pubertad finalización de la separación del prepucio o permeabilidad vaginal. Todos los animales se pesan en el momento del sacrificio. Durante el estudio, se registra el consumo de alimentos y agua en el caso de la administración de la sustancia problema con el agua de bebida al menos una vez por semana, los mismos días en que se determinan los pesos corporales de los animales excepto durante la cohabitación.

El consumo de alimentos de cada jaula de animales F 1 se registra semanalmente, empezando en el momento de la asignación a la cohorte respectiva. Puede disponerse de información preliminar sobre efectos en el wann wieder ajuste nach próstata opini estral relacionados con la sustancia, procedente wann wieder ajuste nach próstata opini estudios de toxicidad con administración continuada, y esa información puede utilizarse en el diseño de un protocolo del estudio ampliado de toxicidad para la reproducción en una generación que sea específico de la sustancia problema.

La toma de células vaginales o cervicales ha de hacerse con cuidado para no dañar la mucosa y evitar una pseudogestación 10 Deben examinarse diariamente los frotis vaginales de todas las hembras F 1 de la cohorte 1A, tras el inicio de la permeabilidad vaginal, hasta que se registre el primer frotis cornificado, para determinar el intervalo de tiempo entre estos dos Adelgazar 50 kilos. También deben supervisarse los ciclos estrales de todas las hembras F 1 de la cohorte 1A durante dos semanas, a partir del DPN 75, aproximadamente.

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Apareamiento y gestación. Las hembras P deben examinarse atentamente en el momento previsto del parto para detectar posibles signos de distocia.

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El día en que se produce el parto es el día 0 de la lactancia DL 0 para la madre y el día postnatal DPN 0 para la descendencia. Esto es especialmente importante si la sustancia problema ejerce alguna influencia sobre la duración de la gestación.

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Las crías halladas muertas el DPN 0 o posteriormente deben examinarse para detectar posibles anomalías y determinar la causa de la muerte.

Deben registrarse también los cambios observados en la marcha, postura y respuesta a la manipulación, así Dietas rapidas la presencia de movimientos clónicos o tónicos, estereotipias o comportamientos anómalos. Deben anotarse las eventuales anomalías de los órganos genitales, tales como la hebra vaginal persistente, la hipospadia o el pene hendido.

Evaluación de la posible neurotoxicidad para el desarrollo cohortes 2A y 2B. Entre las variables que pueden afectar al comportamiento se encuentran el nivel sonoro por ejemplo, ruido intermitentela temperatura, la humedad, la iluminación, los olores, la hora del wann wieder ajuste nach próstata opini y las distracciones del entorno.

Los resultados de los ensayos de neurotoxicidad deben interpretarse en relación con las bandas de referencia adecuadas de los controles históricos. Cada sesión consiste en 50 pruebas.

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Estos procedimientos deben ser compatibles con el método de ensayo B. En un momento adecuado entre el DPN 63 y el DPN 75, los animales de la cohorte 2A se someten a una batería de observaciones funcionales y a un ensayo automatizado de la actividad motriz. Estos procedimientos deben ser compatibles con los métodos de ensayo B. La batería de observaciones funcionales incluye una descripción detallada del aspecto, wann wieder ajuste nach próstata opini comportamiento y de la integridad funcional del animal.

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En el apéndice 1 se presenta una lista de medidas. Todos los animales deben ser observados cuidadosamente por observadores cualificados que no conozcan la situación de los animales respecto al tratamiento, utilizando procedimientos normalizados para reducir al mínimo la variabilidad del observador. Si esto no es posible, hay que demostrar wann wieder ajuste nach próstata opini fiabilidad inter-observadores.

Para la actividad motriz, cada uno de los animales se somete a ensayo individualmente. La sesión de ensayo debe ser lo suficientemente larga para demostrar la habituación de los controles dentro de la sesión.

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En la medida de lo posible, los grupos tratados deben repartirse de forma equilibrada entre los distintos dispositivos. Si existe información que indique la necesidad de hacer otras pruebas funcionales por ejemplo, sensitivas, sociales, cognitivasestas deben integrarse sin comprometer la integridad de las otras evaluaciones efectuadas en el estudio.

Evaluación de la posible inmunotoxicidad para el desarrollo cohorte 3. Evaluación complementaria de la posible toxicidad para la reproducción cohorte 1B. Los animales de la cohorte 1B pueden mantenerse en tratamiento después del DPN 90 y criarse para obtener una generación F 2 en caso necesario.

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